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2023-1123
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室是生命科學(xué)領(lǐng)域中重要的研究實(shí)驗(yàn)室。選擇適合的細(xì)胞科研設(shè)備是實(shí)驗(yàn)室工作成功與否的關(guān)鍵。下面將為您詳細(xì)介紹細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室科研設(shè)備的選購(gòu)方法。實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行什么樣的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),應(yīng)該是您選擇設(shè)備的重要考慮因素。您是否需要進(jìn)行某種特定類(lèi)型的實(shí)驗(yàn),有需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行特殊處理或分析的方法,需要確定這些問(wèn)題后才能確定設(shè)備的種類(lèi)和型號(hào)。其次,您需要考慮設(shè)備品牌和生產(chǎn)商的信譽(yù)度。不同品牌的設(shè)備質(zhì)量和性能各不相同,品牌也可能影響售后服務(wù)的質(zhì)量,別忘了靠譜的售后服務(wù)更具保障。第三,設(shè)備的質(zhì)量和性能...
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2023-1123
一、分子生物學(xué)常用貯存液的配制1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙怖酷膠和1gN,N’-亞甲雙丙怖酷膠溶于總體積為60ml的水中。加熱至37校溶解之,補(bǔ)加水至終體積為100ml。用濾器(0.45μm孔徑)過(guò)濾除菌,查證該溶液的pH值應(yīng)不大于7.0,置棕色瓶中保存于室溫?!咀⒁狻勘揽崮z具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性并可以通過(guò)皮膚吸收,其作用具累積性。稱(chēng)量丙怖酷膠和亞甲雙丙怖酷膠時(shí)應(yīng)戴手套和面具??烧J(rèn)為聚丙怖酷膠無(wú)毒,但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作,因?yàn)樗€可能會(huì)含有少量未聚合材料。一些價(jià)格較低的...
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2023-1123
一、各種蛋白染色方法的靈敏度比較二、考馬斯亮藍(lán)染色CBB染色液0.5%考馬斯亮藍(lán)G250或R25040%甲醇10%乙酸將CBB溶于甲醇中并不停的攪拌15min。加入乙酸與ddH2O脫色液:30%甲醇10%乙酸染色方法:1.在搖床上染色30min.2.脫色至蛋白點(diǎn)或條帶清晰可見(jiàn)3.ddH2O洗3-5次三、膠體考馬氏亮藍(lán)染色ColloidalCoomassieStaining(Cambridgecentreforporteomics)sensitivity=~100ng1.固定:...
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2023-1123
樣品制備原則樣品制備是雙向電泳中最關(guān)鍵的一步,將直接影響2-DE結(jié)果好壞。目前并沒(méi)有一個(gè)通用的樣品制備方法,盡管處理方法多種多樣,但都遵循幾個(gè)基本的原則:1)盡可能的提高樣品蛋白的溶解度,抽提最大量的總蛋白,減少蛋白質(zhì)的損失;2)減少對(duì)蛋白質(zhì)的人為修飾;3)破壞蛋白質(zhì)與其他生物大分子的相互作用,并使蛋白質(zhì)處于變性狀態(tài)。根據(jù)這一原則,樣品制備需要四種主要的試劑:離液劑(chaotropes),主要包括尿素(Urea)和硫脲(thiourea);表面活性劑(sufactants)...
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2023-1122
免疫熒光標(biāo)記法1、細(xì)胞膜上的免疫熒光檢測(cè)法間接標(biāo)記法1)制備單細(xì)胞懸液;2)細(xì)胞計(jì)數(shù),取出1×106個(gè)細(xì)胞于試管中;3)用臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)活細(xì)胞數(shù),要求活細(xì)胞數(shù)90~95%;4)在試管中加入一抗,(劑量按照說(shuō)明書(shū)的要求),孵育30~60分鐘;5)PBS洗滌1~2次,1500rpm,離心3分鐘,棄上清;6)加入二抗,孵育20~30分鐘;7)PBS洗一次,1500rpm,離心3分鐘,棄上清;8)加300μlPBS,上機(jī)檢測(cè)(若不能及時(shí)上機(jī)檢測(cè),可加1ml1%多聚甲醛固定,可放置1周)...
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